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酵母雙雜交基本原理

酵母雙雜交基本原理

酵母雙雜交是一種可以檢測蛋白質-蛋白質相互作用的技術。該技術基於酵母細胞內的兩種互補 DNA序列相遇,使兩個融合的蛋白質互相作用的原理。酵母雙雜交可分為兩種基本類型:酵母一雜交和酵母二雜交。

酵母雙雜交基本原理

酵母一雜交是通過將目標蛋白質與一個 DNA結合域融合,然後與另一個含有報告基因的 DNA結合域構成一個融合質粒,從而使該結合域的融合蛋白僅在目標蛋白質與蛋白質結合時才能激活報告基因的表達。

酵母二雜交是利用酵母細胞的雙雜交體系,在一個被測蛋白質的N端或C端與另一種蛋白質的N端或C端融合後,通過其兩部分的相互作用,再使雙雜交蛋白進一步激活報告基因的表達。這種技術通常使用篩選背景雜交庫來發現交互蛋白。

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