植物組織培養的過程 植物組織培養的過程介紹

1、將採來的植物材料除去不用的部分，將需要的部分仔細洗乾淨，如用適當的刷子等刷洗。把材料切割成適當大小，即滅菌容器能放入為宜。置自來水龍頭下流水沖洗幾分鐘至數小時，沖洗時間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細小的材料，可裝入紗布袋內沖洗。流水沖洗在污染嚴重時特別有用。洗時可加入洗衣粉清洗，然後再用自來水衝淨洗衣粉水。洗衣粉可除去輕度附着在植物表面的污物，除去脂質性的物質，便於滅菌液的直接接觸。當然，最理想的清洗物質是表面活性物質—吐温。

2、對材料的表面浸潤滅菌。要在超淨台或接種箱內完成，準備好消毒的燒杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、無菌水、手錶等。用70%酒精浸10～30秒。由於酒精具有使植物材料表面被浸濕的作用，加之70%酒精穿透力強，也很易殺傷植物細胞，所以浸潤時間不能過長。有一些特殊的材料，如果實、花蕾、包有苞片、苞葉等的孕穗，多層鱗片的休眠芽等等，以及主要取用內部的材料，則可只用70%酒精處理稍長的時間。處理完的材料在無菌條件下，待酒精蒸發後再剝除外層，取用內部材料。

3、用滅菌劑處理。表面滅菌劑的種類較多，可根據情況選取1～2種使用見表。第四步是用無菌水涮洗，涮洗要每次3min左右，視採用的消毒液種類，涮洗3～10次左右。無菌水涮洗作用是免除消毒劑殺傷植物細胞的副作用注意：酒精滲透性強，幼嫩材料易在酒精中失綠，所以浸泡時間要短，防止酒精殺死植物細胞。老熟材料，特別是種子等可以在酒精中浸泡時間長一些，如種子可以浸泡5分鐘。昇汞的滲透力弱，一般浸泡10分鐘左右，對植物材料的殺傷力不大。漂白粉容易導致植物材料失綠，所以對於幼嫩材料要慎用。在消毒液中加入濃度為0.08～0.12%的吐温20或80（一種濕潤劑），可以降低植物材料表面的張力，達到更好的消毒效果。